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上海通蔚生物ELISA試劑盒操作說明、洗滌及注意事項(xiàng)
更新時(shí)間:2025-04-30   點(diǎn)擊次數(shù):1057次


ELISA試劑盒


ELISA試劑盒操作說明:

1、封板膜只做一次性使用。 

2、標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高時(shí)先將樣本稀釋一定倍數(shù)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以稀釋倍數(shù)。

3、各步加樣均使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其正確性,一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi)。

4、液體標(biāo)本置4℃保存應(yīng)小于1周,-20℃。


ELISA試劑盒洗板時(shí)還應(yīng)注意以下問題:

1、需每天校正注液量及殘液量,洗滌后殘液量不得大于2μl;

2、及時(shí)更換破損吸液針,避免破壞底板包被;

3、針對(duì)不同廠家酶標(biāo)板注意調(diào)整吸液頭下降高度,避免沖洗針頭卡住酶標(biāo)板;

4、注意調(diào)整洗液量,洗液量過多將溢出,過少將達(dá)不到洗滌效果;

5、關(guān)機(jī)前使用蒸餾水沖洗管道,避免洗液的結(jié)晶物堵塞管道;

6、不同種試劑盒的洗液嚴(yán)禁混合使用。


ELISA試劑盒注意事項(xiàng):

1.邊緣效應(yīng) 使用96孔板的ELISA測(cè)定中,常發(fā)現(xiàn)有“邊緣效應(yīng)",即外周孔顯色較中心孔深。經(jīng)研究證實(shí)在溫育中的熱力學(xué)梯度可能是根本原因之所。在實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)ELISA測(cè)定中,將板從室溫(通常在25℃左右)置于37℃溫箱,板也升溫時(shí),在外周孔與中心孔之間可能存在一熱力學(xué)梯度。因此使用水浴或在將反應(yīng)溶液加入至板孔中時(shí),將板和溶液均加熱至溫育溫度(如37℃),就可以很容易地排除“邊緣效應(yīng)",并且可提高測(cè)定的重復(fù)性。

2.加樣在現(xiàn)在的ELISA商品試劑盒中,必然有使用微量加樣器加入樣本的步驟。注意的關(guān)鍵點(diǎn)是:加樣不可太快,要避免加在孔壁上部,不可濺出和產(chǎn)生氣泡。加樣太快,無(wú)法保證微量加樣的準(zhǔn)確性和均一性。加在孔壁上部的非包被區(qū),易導(dǎo)致非特異吸附。濺出會(huì)對(duì)鄰近孔產(chǎn)生污染。出現(xiàn)氣泡則反應(yīng)液界面有差異。所以,有時(shí)候一份標(biāo)本用相同的試劑盒這次測(cè)定為陽(yáng)性,下次測(cè)定為陰性,往往就是上述加樣及試劑的錯(cuò)誤所致。


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